玉米颗粒结合型淀粉合成酶(GBSS )基因cDNA的克隆及植物表达载体的构建

根据已发表的玉米颗粒结合型淀粉合成酶GBSS（granule-bound starch synthase）基因序列,设计两对引物,其中一对为定点突变的过度引物。从授粉后15d的玉米胚乳中提取总RNA,以反转录合成的cDNA第一链为模板,首次用定点突变、RT-PCR、融合PCR的方法克隆了GBSS 基因的全长cDNA（1818bp）片段。序列测定表明,该片段与文献报道的序列具有99.72％的同源性。并构建了以胚乳特异表达性的Gt1为启动子,以NOS-ter为终止子的植物表达载体pBI-Gt1-GBSS,其含有NPT‖选择标记基因。以期实现特定时期GBSS基因在玉米胚乳中的大量表达。     

白藜芦醇合成酶(RS)基因转化胡萝卜及高白藜芦醇转基因胡萝卜株系的筛选

白藜芦醇是具有抗病及多种保健功能的芪类次生代谢物,胡萝卜(Daucus carota var.sativa)则是富含β胡萝卜素等多种营养成分的重要蔬菜。研究着眼于创建具有白藜芦醇保健功能的胡萝卜新种质资源,在对葡萄(Vitis vinifera L.)白藜芦醇合成酶(resveratrol synthase,RS)基因在胡萝卜中高效表达的密码子优化基础上构建无潮霉素磷酸转移酶(HPT)抗性基因的转化载体pCB-RS-hyg-,应用根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导法将pCB和pCB-RS-hyg-共转化到胡萝卜并获得再生植株。经过T0、T1和T2代的逐代筛选,获得2个白藜芦醇含量较高(11.34和15.23mg/g)的转基因胡萝卜株系。     

糖基天然表面活性剂蔗糖酯的研究综述

综述了非离子糖基天然表面活性剂蔗糖酯的各种合成方法:酰氯酯化法、酯交换法、酶催化法等.重点介绍了现有的较成熟的酯交换法的各种工艺,包括溶剂法,水溶剂法和无溶剂法,并介绍了不同合成方法相应的精制工艺和检测方法,指出了现有各种工艺的优点和缺陷,并展望了我国蔗糖酯工业发展的趋势.     

甘蔗增糖增产剂试验结果

１９９３年９月下旬至１０月中旬，采用广西农业大学研制、生产的甘蔗增糖增产剂在对旱地和水田蔗的５个品种进行试验，喷药后４０～９０ｄ测定１３个点的甘蔗蔗糖分，平均比对照提高１．３０％（绝对值），甘蔗产量增加５８５０ｋｇ／ｈｍ２；８月份和９月份追施氮肥的甘蔗增糖增产较显著，甘蔗蔗糖分提高１．６９％（绝对值），增产１０３５１．５ｋｇ／ｈｍ２；８月份和９月份不追肥的甘蔗．喷施增糖增产剂的效果相对较差。平均来说，糖厂增利２５８２．２５元／ｈｍ２，农民增收８１９元／ｈｍ２。     

茶树咖啡碱合成酶基因cDNA在烟草中的表达

为了在烟草中合成咖啡碱,将咖啡碱合成酶(Tea caffeine synthase,TCS)基因cDNA全序列克隆到双元载体pBI121中,通过农杆菌叶盘转化法将TCS基因成功转入烟草,结果得到72株转基因烟草植株。对其中3株转基因植株进行PCR检测和PCR-Southern检测,证实TCS基因已整合到基因组中;RT-PCR和Northern分析显示,TCS在这些植株中均能正常转录。用从转基因植株中提取的粗酶液进行体外酶促反应,能催化7-甲基黄嘌呤和可可碱向咖啡碱的转变,由此表明,转基因烟草植株中能产生具有正常生物学活性的TCS,但从3株转基因烟草中均未检测到咖啡碱。     

大肠杆菌BL21(DE3)中表达重组蛋白的研究

为了研究在大肠杆菌BL2 1(DE3)中重组蛋白的表达特点 ,探讨重组蛋白在大肠杆菌中表达时可溶性蛋白与包涵体出现的特点 ,从表达载体中表达了植物ACC合成酶 .经SDS PAGE电泳与双波长扫描分析 ,确定目的蛋白随表达时间、菌液密度的增加而增加 .但是其最佳表达时间为 2 5h ,菌液密度OD6 0 0 为 0 6 ,IPTG的最佳浓度为 0 6mmol L ,此时目的蛋白含量占全菌蛋白含量之比最高 .植物ACC合成酶在大肠杆菌中表达时以包涵体的形式存在 ,未能检测到可溶性蛋白的表达     

丰产剂2号蘸花对番茄果实各部位糖分及淀粉含量的影响

研究了丰产剂2号蘸花对不同发育期番茄果实单果质量、果实各部位糖分组成和含量及淀粉含量的影响。结果表明:丰产剂2号蘸花明显提高单果质量;在番茄果实各发育期,丰产剂2号蘸花的果实各部位糖分组成和含量的总体变化趋势与对照基本相同,果柄维管束中主要含蔗糖,果实其他部位主要含果糖和葡萄糖,果糖和葡萄糖含量在成熟时达到最高;但丰产剂2号蘸花处理的果实中果糖和葡萄糖含量增幅高于对照,说明丰产剂2号蘸花处理可以全面提高番茄果实中可溶性糖的含量。而丰产剂2号蘸花处理对淀粉含量的影响不明显。     

植物芪类植保素研究进展

评述了芪类植保素的研究状况 ,重点介绍了芪类化合物的分布、种类、理化特性、芪类植保素的生物合成、芪合酶基因及其表达调控、芪合酶蛋白、芪合酶基因转化植物及其抗病性等方面的研究进展 ,并讨论了存在的问题 ,提出了今后的研究方向     

昆虫一氧化氮合酶基因研究进展及其同源分析

概述了果蝇、家蚕、长红猎蝽、按蚊和烟草角蛾一氧化氮合酶的生理作用、生化特性、研究方法、基因克隆等方面的研究进展,并采用生物信息学方法比较了5种昆虫NOS的同源性,构建了进化树.     

甘蔗根癌农杆菌介导转化海藻糖合酶基因获得抗渗透胁迫能力增强植株

 由双拷贝CaMV35S启动子驱动担子菌灰树花 (Grifolafrondosa)的海藻糖合酶基因 (TSase)构建植物表达载体 pBBBT ,通过三亲交配法将 pBBBT导入根癌农杆菌EHA10 5菌株 ,经根癌农杆菌介导转化甘蔗 (Saccha rumhybrid)栽培品种 ,以增强甘蔗的抗旱能力。结果表明 ,甘蔗胚性愈伤组织对EHA10 5菌株敏感 ,甘蔗外植体开始大量形成胚性愈伤组织时是感染的适宜时期 ,用膦丝菌素 (PPT)筛选 ,抗性植株发生频率平均为 4 .5 %。经PCR及dot Southern检测证明 ,TSase已经整合到甘蔗基因组中。部分转化植株根叶畸形、株型异常、生长缓慢。移栽到含PEG80 0 0 17.4 % (w/v)的MS培养基后 ,观察到转基因植株抗渗透胁迫能力增强